SARS-CoV-2 슈도바이러스 기반 항체 중화능 평가

▷ 기술요약(Summary)

     - SARS–CoV-2 중화 항체 효능 평가를 위한 슈도바이러스 제작 및 고민감도 분석 기술입니다.

▷ 기술의 장점

   - SARS-CoV-2 바이러스의  고유 모델임

   - 고민감도의  Luciferase를 리포터로 사용하기 때문에 중화능 시험 시 소량의 항체로도 신뢰할 수 있는 결과를 획득할 수 있음

     -  복제 불가능한 슈도바이러스를 이용하기 때문에 BSL-3(Biosafety Levels 생물학적 안전수준 실험실) 시설이 필요하지 않음

▷ 기술소개(Introduction)

     -  렌티바이러스 기반 SARS-CoV-2 spike 탑재 슈도바이러스 제작 및 생산

     -  SARS-CoV-2 슈도바이러스 활용 바이러스 중화 항체 효능 평가

 ⊙ 세부기술 1.  Wuhan-Hu-1 strain 또는 D614G SARS-CoV-2 슈도바이러스 생산

     -  렌티바이러스 기반으로 SARS-CoV-2 spike가 탑재된 슈도바이러스 제작 및 생산

     -  Wuhna-Hu-1(wild type) 또는 D614G spike 단백질 표면에 발현된 렌티바이러스를 기반으로 한 

     슈도바이러스를 HEK293T세포에서 배양 생산

     -  렌티바이러스 기반으로 SARS-CoV-2 spike가 탑재 된 슈도바이러스 제작 및 생산

     -  슈도바이러스는 GFP와 Luciferase 리포터 유전자를 탑재하여 정량 분석 가능

     -  sucrose(수크루스) 농도 차이를 이용한 초고속원심분리기 정제로 고농도 슈도바이러스 생산

 

 ⊙ 세부기술 2. Spike 타겟 중화 항체 및 entry inhibitors 효능 평가

     -  렌티바이러스 기반 SARS-CoV-2 spike 탑재 슈도바이러스 제작 및 생산

     -  SARS-CoV-2의 physiological entry mechanism을 모방하는 슈도바이러스 시스템으로

     바이러스 중화항체 또는 entry inhibitors의 효능을 검증할 수 있는 기술

     -  ACE2 과발현 HEK293T 세포주를 사용하여 Luciferase 시그널이 >106 으로 시험 시료의

     중화능 검증에 필요한 민감도를 충족함

 

▷ 적용분야

     -  SARS-CoV-2 중화항체 및 entry inhibitors 효능 검증

▷ 참고문헌

       - Huetal., Development of cell-based pseudovirus entry assay to identify potential

        viral entry inhibitors and neutralizing antibodies against SARS-CoV-2, Genes &

        Diseases, https://doi.org/10.1016/j.gendis.2020.07.006

▷ 기술 담당자(문의)

• 최적화지원부 담당자: 최원석 부장(043-200-9510) wschoi@kbiohealth.kr
• 첨단의약품팀 담당자: 정효영 팀장(043-200-9371) hchung@kbiohealth.kr